雨生紅球藻內蝦青素(astaxanthin蝦紅素)的合成
紅球藻細胞內的蝦青素(astaxanthin又名蝦紅素)
蝦青素(ASTA又名蝦紅素)在紅球藻細胞內合成和積累會(huì )影啊其產(chǎn)量。Sprey認為次生類(lèi)胡蘿卜素可以在葉綠體中合成,并且可像廣大高等植物的葉綠素一樣參與光和作用。但是,Santos和Mesquita通過(guò)電鏡觀(guān)察發(fā)現,蝦青素不是在細胞器內,而是在細胞內質(zhì)網(wǎng)外面的透明質(zhì)內合成。合成的蝦青素質(zhì)粒最初以顆粒形式存在于核周質(zhì)附近,沒(méi)有生物膜,互相也不容易融合。成熟的蝦青素呈各種形狀,包括長(cháng)絲狀、棒狀和顆粒狀。
蝦青素(astaxanthin又名蝦紅素)的積累
紅球藻在最適生長(cháng)條件下,藻細胞產(chǎn)生葉綠素A、葉綠素B以及初生類(lèi)胡蘿卜素,特別是β-胡蘿卜素和葉黃素。這時(shí)藻細胞為綠色,呈橢圓形,細胞生長(cháng)率很高。當營(yíng)養條件受到限制或在不利環(huán)境下,紅球藻的光合速率與光合作用產(chǎn)物利用速率不平衡,導致碳水化合物的積累,脂肪酸和類(lèi)胡蘿卜素的增加,特別是蝦青素的快速積累。這時(shí)紅球藻的細胞變大,顏色也由綠色變?yōu)榧t色。
ASTA蝦青素的含量及合成速率在紅球藻的生活周期中顯著(zhù)不同。蝦青素的積累速率在游動(dòng)細胞和不動(dòng)細胞中是一樣的,游動(dòng)細胞蝦青素的含量下降是因為它的合成速率低于細胞的分裂速度。任何因素,如不利的生長(cháng)條件和細胞分裂抑制物的產(chǎn)生等,都可引致細胞分裂速度下降,從而導致個(gè)體細胞內蝦青素的快速積累。根據紅球藻分批培養的結果,發(fā)現蝦青素的生成速率在紅球藻的不同生長(cháng)階段是不同的,紅球藻生長(cháng)后期的蝦青素積累明顯高于生長(cháng)早期。
外界條件對細胞蝦青素(astaxanthin又名蝦紅素)積累的影響
許多環(huán)境如光照、營(yíng)養等都可以影響蝦青素的形成,這些因素常常通過(guò)細胞內綜合代謝而發(fā)生作用。
(1)光照度 光照度不但對紅球藻的生長(cháng)是一個(gè)非常重要的因素,而且對紅球藻蝦青素的合成也是很重要的。普遍認為光照度對紅球藻的生長(cháng),特別是對紅球藻內蝦青素的合成是必需的。相反,也有人認為蝦青素的合成可以在黑暗中進(jìn)行,只是蝦青素的合成速率在光照條件下比黑暗條件下高7倍。強光對紅球藻的生長(cháng)不利,特別是在紅球藻的生長(cháng)早期,強光顯著(zhù)地抑制紅球藻的生長(cháng)誘導促進(jìn)蝦青素的合成。紅光比藍光對紅球藻的生長(cháng)有利,而藍光對蝦青素的積累有利。
(2)溫度溫度對紅球藻蝦青素的生物合成的影響與光照度很相似,較高的溫度可以促進(jìn)蝦青素的生物合成。據Tjahjono等報道,在30℃條件下,紅球藻的產(chǎn)量比20℃培養條件高2.5倍。但是,Borowitzka認為,最適合紅球藻光合自養的溫度在25~28℃之間。溫度高于30℃時(shí),紅球藻的生長(cháng)受到抑制。所以,較高的溫度促進(jìn)細胞內蝦青素含量的增加,適用于紅球藻培養的后期。
(3)溶解氧 較低的溶解氧(50%)有利于紅球藻自養生長(cháng),而飽和的溶解氧則有利于紅球藻的異養生長(cháng)。溶解氧對紅球藻蝦青素含量的影響尚有待研究。
(4)PH值 PH值對對紅球藻蝦青素細胞含量的影響目前尚未有詳細報道。一般認為,最適合于紅球藻生長(cháng)的pH值為中性至微堿性,雖然紅球藻在pH=11的條件下仍然可以生長(cháng)和成活,但其生長(cháng)速率很低。
(5)培養液的流體剪切力的影響 通過(guò)對攪拌速度對紅球藻的生長(cháng)和蝦青素的影響的研究,發(fā)現如果流體剪切力高于0.05N/M,則會(huì )阻礙紅球藻的生長(cháng),促進(jìn)蝦青素的合成。
(6)培養基的優(yōu)化 醋酸鹽是應用于紅球藻混合培養的比較好的碳源,它除了容易被紅球藻利用于生長(cháng)外,也很容易被紅球藻吸收參與蝦青素的合成。
對于氮源的需求,科學(xué)家有不同意見(jiàn),大多數認為低濃度的氮源對蝦青素的合成有利。 但Goodwin報道,如果紅球藻在含有醋酸鹽的培養基中,高濃度的氮源有利于蝦青素的合成;此外,較高的亞鐵離子濃度有利于蝦青素的合成;低濃度的磷酸鹽可以促進(jìn)蝦青素的合成,但并不顯著(zhù)抑制紅球藻的生長(cháng)。
(7)環(huán)境條件的優(yōu)化 除了對培養基的優(yōu)化,其他環(huán)境條件如溫度、PH、光照、溶解氧的優(yōu)化組合對于提高紅球藻蝦青素的生長(cháng)率也非常重要。但是適于紅球藻生長(cháng)與蝦青素合成的條件往往是互相矛盾的,即當環(huán)境條件如溫度,PH值、光照、溶解氧、培養基成分和濃度有利于紅球藻生長(cháng)時(shí),蝦青素的合成速率通常較低;而蝦青素快速合成的時(shí)期發(fā)生在不利于紅球藻生長(cháng)的環(huán)境條件下。
可采用分步培養的方法生產(chǎn)蝦青素:首先利用紅球藻的最優(yōu)生長(cháng)條件促使紅球藻細胞于物質(zhì)增加,然后改變條件使紅球藻能快速合成蝦青素(ASTA又名蝦紅素)。